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大鼠少突膠質前體細胞的原代培養及取材事項

更新時間:2022-10-21點擊次數:1283
  什么是大鼠少突膠質前體細胞的原代培養?嚴格地說原代細胞培養是指從動物機體取出的組織經各種酶、螯合劑或機械方法處理,分散成單細胞,選用合適的培養基在體外進行的首次培養,也叫初代培養。通常把一代至十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。
  
  原代細胞培養主要包括取材→分離→培養等三部分。原代培養是建立各種細胞系的開始,是實驗人員需掌握的一項基本技術。原代培養的細胞其生物學特性未發生很大變化,接近和能反映體內生長特性,仍具有二倍體遺傳特性,因此適用于藥物敏感性試驗、細胞分化、細胞生長代謝等實驗研究。
  
  大鼠少突膠質前體細胞取材應該注意什么?
  
  動物體內大部分的組織細胞都可以在體外培養,但其難易程度與組織類型、分化程度、供體年齡、供體健康狀態、原代培養方式等有直接關系,也是決定原代培養成敗的關鍵。
  
  因此原代取材我們應滿足以下要求:
  
  1、取材時注意無菌操作,使用的手術器械、培養皿以及試劑都應保證無菌;
  
  2、使用的手術器械應鋒利,使其在剪碎組織的時候盡可能減少對細胞的機械損傷;
  
  3、對組織樣本帶有血液、脂肪、結締組織的,在處理組織時應盡可能去除這些非目的組織;
  
  4、如無特殊要求,可采用更加容易培養的組織進行培養,提高培養成功率;
  
  5、取材過程盡量要快,保證組織新鮮;
  
  6、原代培養應采用應用豐富的培養液,一般添加5%-20%胎牛血清;
  
  7、對組織的來源、部位、取材時間、處理方法以及供體的一般情況都需做好記錄。
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